RNA提取試劑提供了一種快速，簡單，經(jīng)濟有效的方法，可從全血，哺乳動物細(xì)胞，細(xì)菌細(xì)胞和真菌細(xì)胞中分離總RNA。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細(xì)胞并滅活核糖核酸酶。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上，同時使污染物通過柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫，不用酚提取或醇沉淀。
RNA提取試劑主要物質(zhì)是異硫氰酸胍，它可以破壞細(xì)胞使rna釋放出來的同時，保護rna的完整性。加入氯仿后離心，樣品分成水樣層和有機層。rna存在于水樣層中。收集上面的的水樣層后，rna可以通過異丙醇沉淀來還原。
無論是人、動物、植物還是細(xì)菌組織，trizol法對少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>;107)均有較好的分離效果。RNA提取試劑TrizolReagent操作上的簡單性允許同時處理多個的樣品。所有的操作可以在一小時內(nèi)完成。trizol抽提的總rna能夠避免dna和蛋白的污染。故而能夠作rna印跡分析、斑點雜交、poly(a)+選擇、體外翻譯、rna酶保護分析和分子克隆。提取時需要注意一些問題：提取時要做到超凈臺內(nèi)操作、操作帶一次性手套、ep管及tip頭都要用0.1%處理（0.1%depc浸泡過夜后，高壓蒸氣滅菌）、小心、細(xì)致、晃動及每次移液要輕。這樣做的*目的就是兩個，一是小心rnase的污染降解rna；二是動作過度暴力破壞rna的完整性。
另外你提的rna做電泳的問題，一般rna電泳應(yīng)該是做甲醛變性電泳，但是一般的瓊脂糖電泳也可以，需要上樣量稍微大些，并且跑電泳的時間越短越好。
點擊交流